植物乳杆菌高密度增殖发酵条件的研究

为了研制新型微生态制剂, 对常用益生菌株--植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum) 的增殖条件进行研究.通过单因素和响应面方法对植物乳杆菌Lp-2 的发酵培养基成分进行了筛选和优化, 确定了最佳培养基.最后,研究了大规模培养工艺及其培养过程的放大.试验表明:蔗糖29 g/L,酵母膏31 g/L,蛋白胨25 g/L,K2HPO4 20 g/L,NaAc 6 g/L,柠檬酸氢二铵2 g/L,Tween80 2 g/L,MgSO4 0.1 g/L, MnSO4 0.1 g/L,在25℃、100 r/min的培养条件下在3 t发酵罐培养9.6 h,所得植物乳杆菌的最大产量约为1010 CFU/mL.实验表明了此植物乳杆菌增殖优化方案成效明显,可以放大推广生产.     

德氏乳杆菌保加利亚亚种优良菌株的筛选

以分离自传统发酵乳的55株德氏乳杆菌保加利亚亚种为研究对象,通过分析其发酵时间、后酸化、黏度、脱水收缩性和游离氨基酸态氮等发酵特性,最终得到3株可作为酸乳发酵剂用的德氏乳杆菌保加利亚亚种菌株,分别为IMAU80319、IMAU20422和IMAU20404.     

不同组合益生菌对育成期水貂生长性能和消化代谢规律的影响

本试验旨在研究不同组合益生菌对育成期水貂生长性能和营养物质消化率及氮平衡的影响。选择96只60日龄、健康状况良好的水貂,随机分为4组,每组24只,公、母各半。对照组饲喂基础日粮,试验1、2、3组分别在基础日粮中添加0.06 g地衣芽孢杆菌+0.06 g枯草芽孢杆菌、6 g安琪酵母+12 mL乳酸菌、0.06 g地衣芽孢杆菌+0.06 g枯草芽孢杆菌+6 g安琪酵母+12 mL乳酸菌。在水貂育成期内进行饲养与消化代谢试验,分析不同组合益生菌对水貂平均日采食量、平均日增重、料重比、粗蛋白质和粗脂肪的消化率及沉积氮、蛋白质生物学价值和净蛋白质利用率的影响。结果表明,与对照组相比,试验1组公貂的干物质消化率和试验2组公貂的脂肪消化率显著下降(P<0.05),但不同组水貂的生长性能和氮平衡及母貂的营养物质消化率未受到益生菌的影响(P>0.05)。提示,日粮中添加益生菌不会显著改善育成期水貂的生长性能、营养物质消化率及氮平衡,故在水貂健康的前提下,无需在育成貂日粮中添加益生菌。     

6株羊源乳酸杆菌电转化条件的优化

选取质粒pLEM415-egfp电转化源于陕北白绒山羊瘤胃的乳酸杆菌,研究不同生长时期及电场强度对6株羊源乳酸杆菌电转化效率的影响,并优化其转化条件。在37 ℃培养条件下,培养6株羊源乳酸杆菌,当D_{600 nm} 达到0.4、0.6、0.8、1.0和1.2时,离心收集菌体,制备感受态细胞;在电阻200 Ω、电容25 uF条件下,分别采用1.5、2.0和2.5 kV 3种电场强度电击转化感受态细胞。结果表明,羊源植物乳酸杆菌(Lactobacillus plantarum)、干酪乳酸杆菌(Lactobacillus casei)、罗伊乳酸杆菌(Lactobacillus reuteri)、短乳杆菌(Lactobacillus brevis)、棒状乳酸杆菌(Lactobacillus coryniformis)和弯曲乳酸杆菌(Lactobacillus curvatus)获得最高转化效率的D_{600 nm}和电场强度分别为0.8、1.2、1.0、0.6、0.8、0.4和1.5、1.5、1.5、1.5、1.5、2.0 kV。羊源乳酸杆菌最佳转化条件的确立,为后续乳酸杆菌转基因工程菌的构建及其应用奠定了基础。     

一株干酪乳杆菌对养殖水体亚硝酸盐去除机理的研究

为了解乳酸菌去除养殖水体亚硝酸盐的作用机理,实验研究了一株干酪乳杆菌L821a(Lactobacillus casei)对淡水鱼养殖水体亚硝酸盐的去除状况,通过对菌体、酶及代谢产物的实验,证明其去除亚硝酸盐的机理包括胞内酶作用、代谢产物乳酸的直接化学反应2H++3NO2-=NO3-+2NO↑+H2O作用和间接促进微生物反硝化作用3种作用机理。在养殖水体中主要以间接作用方式发挥作用。分析认为乳酸促进反硝化作用的原因在于为反硝化微生物提供了易于利用的有机碳源(能量物质)。     

破壁方法对短乳杆菌谷氨酸脱羧酶提取效果的影响

采用不同的破壁方法提取短乳杆菌谷氨酸脱羧酶（GAD）,研究破壁方法对所得GAD活力的影响。结果表明,超声波破壁有利于菌体释放胞内谷氨酸脱羧酶。正交试验结果表明,超声波破壁的最佳工艺条件为：超声功率220 W,工作时间20 min,工作/间歇时间比5 s/10 s。     

Lactobacillus casei AST18抗真菌特性及其在酸奶保鲜中的应用

 【目的】考察来源于中国传统发酵制品中乳酸菌的抑真菌特性,研究其在酸奶贮藏中的抑制霉菌效果。【方法】高效液相色谱法（HPLC）检测7株具有抗真菌效果的乳杆菌发酵液中苯乳酸（PLA）含量,研究PLA与乳杆菌发酵液抗真菌活性的相关性。选取抑菌活性最强的菌株Lactobacillus casei AST18进行抑菌特性研究。Lactobacillus casei AST18分别以2%、4%、6%、8%接种量作为辅助发酵剂添加至酸奶发酵工艺中,成品酸奶贮藏期间,监测酸奶中霉菌生长状况,检测酸奶理化指标并进行感官评定。【结果】乳杆菌发酵液中苯乳酸含量与其抑真菌直径间相关关系不显著。Lactobacillus casei AST18发酵上清液经胃蛋白酶和胰蛋白酶处理后不影响其抑菌活性,而环境pH对其抑菌活性的影响显著,热处理可使其丧失抑菌活性。Lactobacillus casei AST18以 2%添加量作为辅助发酵剂应用在酸奶中可抑制霉菌菌丝生长和孢子生成,且对酸奶产品风味、感官品质无显著影响。【结论】Lactobacillus casei AST18具有较好的抑制霉菌生长能力,应用在酸奶中具有显著的防霉保鲜效果。     

乳酸菌微生态制剂对肉鸡生产性能及免疫机能的影响

本实验利用乳酸菌微生态制剂饲喂AA肉鸡,通过检测鸡增重、料重比、免疫器官指数、抗体效价以及盲肠内容物的乳酸菌和大肠杆菌数量,探索乳酸菌微生态制剂对肉鸡生产性能及免疫功能的影响。首先将150只肉鸡随机分成3组,第1组在饮水中添加0.3%的乳酸菌微生态制剂,第2组添加抗生素饮水,第3组为空白对照组,7日龄时接种新城疫疫苗;于每周末称取各组鸡的体重、耗料,计算增重和耗料量;在21日龄和35日龄时,采取各组鸡的脾脏、法氏囊和胸腺、分别计算免疫器官指数;用HI和微量平板滴种法分别检测抗体效价和盲肠内容物乳酸菌、大肠杆菌数量。结果显示,添加0.3%乳酸菌微生态制剂组与对照组和抗生素组鸡比较,分别提高鸡体重15.55%和8.57%(差异显著P<0.05),料重比分别降低5.11%和4.57%;于21日龄和35日龄时检测发现,添加0.3%乳酸菌微生态制剂组与对照组鸡比较,脾脏、法氏囊和胸腺指数分别提高了44.26%1、3.51%、33.96%和67.14%、16.47%3、8.16%;抗体水平分别升高了1.8log2和2 log2,差异显著(P<0.05),与抗生素组比较,抗体效价分别提高了1.4log2和1.75log2,差异显著(P<0.05);另外,21日龄和35日龄时,与对照组比较,添加0.3%乳酸菌微生态制剂鸡盲肠内容物中乳酸菌数量分别增加1.28log2和0.27log2,差异显著(P<0.05),同时分别使大肠杆菌数量减少1.88log2和0.84log2,差异显著(P<0.05)。本研究为合理开发利用乳酸菌微生态制剂提供了理论依据和技术支持。     

酸菜来源植物乳杆菌耐受性和吸收胆固醇能力

酸菜是东北地区一种传统的发酵食品,因其独特的口感深受人们的喜爱。酸菜中的乳酸菌对其品质具有重要影响。本研究从酸菜中分离筛选2株菌,经API50CH初步鉴定为植物乳杆菌,并对2株菌的耐人工胃胰液能力、耐胆盐特性、胆固醇吸收能力进行研究。结果表明,2株植物乳酸杆菌都能够耐受pH3.0的人工胃液（3h活菌数为4.16、4.49 logcfu/mL）、pH8.0的人工胰液和10g/L胆盐（4h活菌数为6.97、.1 log cfu/mL）。该菌具有良好的降胆固醇活性,3g/L胆盐浓度下胆固醇的去除量最高。本实验的研究结果为功能性益生菌的筛选和应用奠定了基础。     

CRISPRs在德氏乳杆菌中的检测与同源性分析

本研究检测了本实验室德氏乳杆菌中的CRISPRs结构,并对其重复序列和间区序列进行了同源性分析.结果显示,供试菌株L7和L9中均含有CRISPRs序列,分别为3 323 bp和3 015 bp,多重比对后的重复序列8～12位与21～17位碱基互补形成回文结构;重复序列大小(29 bp)与标准菌株基本相同,但其同源性与菌...